番茄胚轴伸长速率测定

一、实验测定技术

动态成像系统应用

采用拟南芥幼苗高通量动态成像平台（DynaPlant），可实现每分钟0.1μm精度的胚轴生长曲线追踪，适用于番茄胚轴伸长动态监测

激素处理方案

生长素（IAA）浓度梯度：10 μmol/L处理下大豆下胚轴延伸速率在1小时后显著提升，该浓度可作番茄实验参考

ABA拮抗效应：150 μmol·m⁻²·s⁻¹光照或150 mM甘露醇处理可使番茄胚轴内源IAA含量下降，伸长抑制率达40-60%

二、关键影响因素

因素 影响机制 数据参考

光照强度 强光（150 μmol·m⁻²·s⁻¹）通过诱导ABA合成抑制伸长，黑暗环境促进伸长

野生型番茄胚轴缩短35%

渗透胁迫 甘露醇处理导致细胞壁扩展基因（EXPs/XTHs）表达下调，延伸速率降低50%

激素互作 ABA通过SlDAO2基因催化IAA氧化降解，破坏生长素稳态

突变体dao2对ABA响应减弱

三、操作注意事项

样本处理

切段培养需含2%蔗糖维持渗透平衡，避免细胞失水

移栽窗口期：胚根长至12mm时需及时移栽，超72小时易致根系缠绕（缠绕率40%）

数据记录

需同步记录室温、水温及激素处理时间，误差控制在±0.5℃以内

四、延伸技术对比

化学固定法：传统测量需终止生长，无法反映动态过程

活体成像优势：可捕捉到光照/激素处理的瞬时响应（如10分钟内生长速率变化）

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